食品和饲料中三聚氰胺检测方法有哪些？
2三聚氰胺的检测方法
三鹿奶粉事件后，我国迅速出台了奶粉和饲料中的三聚氰胺检测方法，《GBT22388-2008原料乳及乳制品中三聚氰胺检测方法》和《NYT1372—2007饲料中三聚氰胺的测定》。实际检测中发现某些样品虽然没有检出三聚氰胺，但可以发现其类似物。我国只检测三聚氰胺，而美国、日本等国要求同时检测三聚氰胺及其同系物。胺和酸为二类化合物，很难同时分析，二次检测成本和时间不容许。美国FDA采用ZIC-HILIC色谱柱pH梯度和浓度梯度LC-MS法实现了二者的同时检测。到目前为止，三聚氰胺的检测方法有传统的苦味酸法和升华法，还有电位滴定法、色谱法、色谱-质谱联用法、酶联免疫法、毛细管电泳法、近红外吸收法等。
2.1苦味酸法与升华法
苦味酸法三聚氰胺完全升华后，称其残渣量，即测得三聚氰胺纯度。这两种方法准确度均较高，且对仪器要求较低，但操作繁琐，分析时间太长，不适合于生产中间控制分析中测定溶液中三聚氰胺的含量。
2.2电位滴定法
电位滴定法原理是先测定三聚氰胺溶液中总固体的含量，用硫酸标准溶液滴定热溶液至pH为5，流水冷却溶液至室温，滴定直至pH为3。根据消耗硫酸标准液的体积计算结果。该法操作简便，结果准确，但不适于现场和多个样品的检测。食品基质中化学组成比较复杂，运用此法时准确度会受到影响。陈一虎对同一试样进行多次平行测定，测定结果的变异系数为0.98%，在试样中加入标准样品0.12500g进行回收率实验，回收率在89.28%至93.80%之间。
2.3试剂盒检测法(酶联免疫法，ELISA)
ELISA是用三聚氰胺HRP酶耦合物作为标准品，与样品中萃取的三聚氰胺同时放入多孔试剂板上。经过30min的培养，样品中的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物与三聚氰胺抗体竞争性结合。经过这30min的培养，任何没有结合的三聚氰胺和三聚氰胺HRP酶耦合物将被冲洗掉，显色酶底物加入微孔中，任何结合的酶耦合物都会使液体呈现蓝色。等反应结束后，用酶标仪读数，再将未知样品的读数和标准品的读数比较，就能得出样品中的三聚氰胺浓度。酶联免疫法可以满足日常食品卫生执法中检测三聚氰胺项目的要求，具有低成本、高通量检测三聚氰胺项目的优势，每次能检测多个样品，这是其他三聚氰胺检测方法所无法比拟的，而且不需要非常昂贵、复杂的仪器，样品制备过程简捷，技术操作方便，检测时间不超过2h，检测范围为20～500ng/mL。但是检测样品中如果存在与三聚氰胺类似的物质，则有可能会干扰实验结果，需要采用HPLC、HPLC-MS、GC-MS方法做进一步的精确分析。目前，进口的三聚氰胺ELISA检测试剂盒，有BeaconAnalyticalSystems公司的BeaconMelaminePlateKit、Abraxis公司的MelaminePlatekit、StrategicDiagnostics公司的EnviroGardTriazinePlatekit等。国产的三聚氰胺ELISA检测试剂盒有中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所开发的检测三聚氰胺的酶联免疫试剂盒等。
2.4液相色谱检测法
液相色谱法可对食品和饲料中三聚氰胺进行定性和定量分析，具有操作简单、灵敏度高，测定周期短等优点。陈垂凤用高效液相色谱法建立了乳制品中三聚氰胺的检测方法。采用XBP-C8柱(250.0mm×4.6mm，5.0μm)，流速为1.0mL/min，柱温为40℃，进样量为20μL，流动相为柠檬酸+辛烷磺酸钠+乙腈+碱性水(25.000%～28.000%的NH3•H2O调pH为3.0)。测定线性范围为2.00～10.00mg/kg。
吴彩梅等建立采用固相萃取净化，高效液相色谱法测定鸡蛋中三聚氰胺含量的方法。样品采用三氯乙酸和乙酸铅溶液提取，经优化实验，确定样品提取20min，采用C-C18(4.6mm×
150mm，5μm)色谱柱和PCX固相萃取柱。采用紫外检测器，检测波长为240nm，流动相为乙腈:辛烷磺酸钠-柠檬酸缓冲液(10:90，v/v)，流速1.0mL/min，进样量20μL，外标法定量。三聚氰胺在1～50μg/mL范围内，具有良好的线性关系，在添加质量浓度为5～20mg/kg范围内，三聚氰胺添加回收率在72.8%～87.6%，RSD(n=6)为1.5%～4.0%，最低检测限为0.54mg/kg。