1.1基因型对再生的影响
不同基因型的黄瓜材料,在诱导愈伤、不定芽和生根等方面均有显著差异。 [2]以 85个基因型的子叶外植体为材料,在相同的诱芽培养基上仅有 28个基因型的外植体有不定芽发生;杜[3]发现在 12个黄瓜品种之间,不定芽诱导率最高可达 73%,最低只有 25%; [4]以东北地区 4个黄瓜主栽品种为材料,发现不定芽的诱导率显著不同; [5]研究表明,不同基因型黄瓜的子叶节的再生芽数明显不同。[6]进行了黄瓜子叶诱导不定芽的研究,发现 6-BA和 ABA搭配时,出芽率达 86.1%; [7]发现, NAA诱导的愈伤比 2,4-D诱导的愈伤容易分化出芽点,在 MS附加 BA 2.0 mg/L、NAA 0.3 mg/L和 GA3 0.25 mg/L的培养基中芽分化率可达 64%; [8]指出极低浓度的 NAA能诱导出大量愈伤组织;但也有学者持相反意见,认为 NAA不利于黄瓜材料 c-8的子叶再生,而 IAA能较好地促进其再生。除此之外,也有关于其他激素能促进再生的报道。 [9]等优化了 TDZ和 IBA的组合浓度,发现在 0.005 mg/L TDZ+0.05 mg/L IBA的培养基中,不定芽的诱导率达到 93.3%; [10]认为鲁黄瓜 9号的最佳诱芽培养基为 MS+0.06 mg/L TDZ。
1.2激素组合对再生的影响
外源激素的种类及浓度对黄瓜不定芽的诱导和生长具有重要作用。基因型不同,对激素种类和相互配比的要求也不尽相同。从相关的报道看,黄瓜组织培养中较常用的激素有 6-BA、NAA和 IAA,近年来也有 TDZ能快速诱导芽分化的文献报道。
1.3外植体类型与苗龄对再生的影响
(1)组织培养中外植体的种类对不定芽的再生影响很大。在黄瓜组织培养中使用的外植体类型有子叶、下胚轴、原生质体、真叶、茎尖、叶柄、花药、未受精的子房等。
(2)以往大多采用子叶作为诱芽外植体,近年来的研究则趋向认为子叶节是诱导率最高的外植体。另外也有用真叶、茎尖等作为外植体进行诱芽的研究。此外,人们对黄瓜原生质体的分离和再生也进行了研究。